上海中医院
术后肠梗阻（POI）的主要症状包括恶心、呕吐，不能从口腔进食，腹胀，延迟胃肠气和粪便的排泄。POI是胃肠或其他手术术后的普遍现象，导致了死亡率的上升和医药费用的增长。临床研究表明，电针能改善肠道紊乱，减少术后排便的时间，加快术后胃肠运输。然而，电针所致的CT恢复机制尚不清楚。日本明治京都中西医结合大学针灸系学者发明了一种新方法，在X射线下使用不透射线的标记物来测量时间序列下大鼠的肠蠕动，观察电针大鼠足三里对于应激手术（SS）导致的POI的影响，并运用药理学技术探讨清醒大鼠电针导致CT恢复的机制。研究成果发表于年4月MEDICALACUPUNCTURE杂志。1材料和方法动物45只雄性斯普拉-道来大鼠（体重~克）。每只大鼠被单独安置在控制温度（22~24℃），湿度和光照（12:12光照/黑暗周期，光照周期从7:00am开始）的条件下，可以随意获得实验室的食物和水。为确保适当的适应，所有大鼠在实验前至少在标准条件下饲养7天。所有实验都从9:00am开始，所有程序都按照英国内政部动物指南（科学程序）执行，并且该方案被日本京都明治中西医结合大学动物研究委员会批准。SS所致POI手术方法大鼠被禁食一晚并且用2%的异氟醚进行麻醉。经腹中线切开，将硅橡胶套管（内径2mm；外径4mm）插入每个大鼠盲肠，并进入近端结肠定位。管子的近端部分在皮下从左腹壁穿到后颈部，并固定于皮肤。CT的测量这些大鼠被随机分成5组如下：（1）手术应激（SS）组（n=9）设定为POI组，于术后第一天进行测量；（2）术后5天（POST-5D）组（n=9）组设定为恢复组（正常状态），于术后5天进行测量；（3）手术应激+酚妥拉明(SS+PA)组（n=9），术后第一天使用酚妥拉明后进行测量；（4）电针(EA)组（n=9），在术后第一天测量之前进行电针；（5）电针+阿托品(EA+A)组（n=9）在术后第一天测量之前进行电针和阿托品的使用。动物在测量前禁食24小时。在术后第一天或第五天，用1.0ml生理盐水给大鼠近端结肠注射20个金属不透射线标记物（直径1.5mm）。2%异氟醚的麻醉下持续两分钟，用软X射线在整个胃肠道内观察这些标记物。从注射标记物后即刻到注射后分钟，每30分钟拍摄9张照片。在肠道运输测量后，近端结肠注入1ml钡，可以看到整个结肠的图像。在9个X射线成像周期之间，大鼠在没有麻醉剂的影响下，可以在笼子里自由活动，并随意获得水。几何中心的计算使用GIMP2.8.22版软件处理图像后，计算标记物覆盖的距离，并将结肠分为10个等分段（ImageJ1.5i，国立卫生研究院，贝塞斯达，马里兰州）。在结肠内不透射线的标记物分布的几何中心（GC）用以下方程式计算：GC=∑（标记物的数量）*（分段数量）GC以任何单位表示。药物治疗为了研究α-肾上腺素受体在调节SS中的作用，在给标记物之前，腹腔注射1mg/kg酚妥拉明（SigmaAldrich，StLouis，MO）和0.5ml生理盐水。为了探讨胆碱能通路在电针对SS导致CT变化的影响中的作用，电针前，腹腔注射0.05mg/kg阿托品（三菱田边制药公司，大阪，日本）和0.5ml生理盐水。电针方案用钩形针可以避免插入大鼠体内的针灸针自发性掉落。在给标记物之前，在两侧足三里穴位处的皮肤和肌肉下插入不锈钢针灸针（直径0.34mm；长度30mm；朝日公司，崎玉，日本），深度5mm。足三里穴位位于胫骨前结节下外侧5mm处。插入的针与一个电脉冲发生器（欧姆脉冲发生器LFP-0e，Zeniryoki公司，福冈，日本）连接，在1%的异氟醚麻醉维持下，用电流（交流电频率为10Hz，持续50ms，强度0.01mA）刺激每只大鼠20分钟。统计分析数据表示为均值±均值标准差。组内每个时期统计比较首先用单向方差分析进行进行分析，如果发现差异则进行事后分析。与SS组比较，用Dunnett试验测定各组GC的变化，P0.05有统计学意义。数据分析采用JMP12.2.0版（SAS-Institute-Japan）。2结果：图1显示了各组中所有术后CT的典型图像。在SS组中，从0到分钟,标记物在近端结肠（术后1天；图1A）。POST-5D组，大鼠术后恢复后，在分钟时标记物到达了远端结肠（图1B）。在SS+PA组，一些标记物在30分钟时通过肛门排出，因为酚妥拉明加速了CT（图1C）。此外，在EA组，在90分钟时标记物在远端结肠被发现，这意味着EA组比SS组CT明显增快，这和POST-5D组的标记物的转运相似（图1D）。然而，在EA+A组，在分钟时，在近端结肠末端被检测到标记物（图1E）。这意味着阿托品中和了电针对于CT的影响。
注射标记物之后即刻，组与组之间GC没有发现差异，但是30分钟到分钟内出现了显著变化（表1）。在30分钟和60分钟的时，SS+PA组的GC比SS组明显增快。然而，SS组和其他各组之间相比，GC没有差异。
90分钟时，POST-5D组，SS+PA组和EA组的GC与EA+A组不同，比SS组显著增大。分钟到分钟时，与SS组相比，POST-5D组，SS+PA组和EA组内GC有显著变化，EA+A组GC与SS组无显著差异。分钟时，与SS组相比，POST-5D组和SS+PA组GC有显著变化，而EA组和EA+A组的GC与SS组无显著差异。
3结论研究表明，电针通过α肾上腺素受体的交感神经通路减少SS所致CT延迟。这表明了电针可以通过自主神经系统的调解来治疗POI。
图1每组不透射线标记物的结肠运输的图片.比例尺?=?50?mm.每个时间点标记物被染成不同的颜色.(A)SS组.(B)POST-5D组.(C)SS+PA组.(D)EA组.(E)EA+A组.网上可以获得彩色图片.表1.各个时段各组的几何中心4中西合璧论述POI的特点是术后肠道运输和协调运动停止，从而阻止了肠内容物的有效运输或口服的耐受性。POI发病机制是多因素的，与神经、炎症、体液和药理学因素之间复杂的相互作用有关。在该时间序列研究显示，酚妥拉明消除了术后CT的延迟。因此认为SS所致CT延迟是通过α肾上腺受体增强了交感神经活性。该研究结果表明，电针改善了术后CT，这不仅对远端结肠产生影响同时也对近端结肠产生了影响。鉴于电针对于CT的作用被阿托品中和，这些结果提示电针通过增强副交感神经通路改善术后CT。但电针也有可能抑制交感神经，它通过儿茶酚胺作用于突触前副交感神经抑制乙酰胆碱的释放。因此，该研究观察到的副交感神经的增强可能是由于电针抑制交感神经所致。此外，疼痛会上调交感神经通路，导致CT延迟。由于疼痛评估没有像之前的研究一样被纳入该研究中，电针的镇痛作用也可能起到了改善受损的CT的作用。因此，电针的作用是否还与交感神经途径、阿片类药物、OXT和抗炎反应等相关尚不清楚，有待进一步研究。这项研究对大鼠CT的描述比早期的研究更加详细。在X射线显示下使用不透射线的标记物的这种新测量方法的优点是可以对同一只大鼠的CT进行重复评估。用这种新的测量方法，可以用较少的实验和动物来研究CT，加速了数据的积累，在CT相关的研究中值得进一步推广。翻译：丁迪卿；评述：陆黎
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点击标题，温故知新
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